TRANSCRIÇÃO

Ø  PROCESSO DE TRANSCRIÇÃO

Pode ser entendida como o processo na qual uma fina de RNA será sintetizada a partir de uma fita de DNA através do pareamento complementar de bases. Esse mecanismo pode ocorrer com o auxilio de uma proteína chama de RNA­­_{polimerase ­} ou por fatores de transcrição. Sendo que a RNA_pol­ irá trabalhar colocando os ribonucleotídios em sua posição com a base complementar.

·         Transcrição em procariotos

Em procariotos ocorre a atuação da RNA­­_{polimerase ­}e do fator σ (fator sigma). De inicio, esses dois se conectam e formam a holoenzima RNA_polimerase, onde o fator σ encontra-se com ligações fracas. Esse conjunto realiza ma ligação fraca com a fita de DNA, podendo se deslocar por ela.

Quando enfim encontra o promotor, a ligação entre a fita e a holoenzima se fortifica, então a RNA_pol  atua separando duas fitas para que uma seja utilizada como molde dentro de uma bolha de transcrição.

No fim da síntese uma cadeia de 10 nucleotídeos é formada, a RNA_poli rompe as interações com o fator σ e ocorre o desligamento. Então a RNA­_pol continua a transcrição com velocidade de 50 nucleotídeos/segundo e o alongamento da cadeia continua até que a polimerase encontre com o sinal de término, fazendo com que a enzima se solte da fita e libere a fita recém-criada.

·         Transcrição em eucariotos

Há algumas distinções básicas entre a transcrição em procariotos e eucariotos. A primeira é que há presença de três tipos de RNA_pol, a outra é que a transcrição procariótica ocorre no hialoplasma, enquanto nos eucariotos ocorre no núcleo e é mais complexo.

Neste tipo de transcrição não ocorre a formação da holoenzima RNA_{polimerase ­}, porque ocorre através de fatores de transcrição.

A transcrição se inicia quando o fator TFIID – que é uma proteína de ligação a TATA (TBP) – liga-se a uma região da dupla hélice que é rica em timina e adenina chamada de TATA-BOX e atrai outros GTF (fatores gerais de transcrição) e a RNA_polimerase II e formam o complexo de pré-iniciação.

A TFIID atua expondo a fita molde de DNA e fosforila aminoácidos que estão localizados na calda do RNA_pol que é chamada de domínio carboxila terminal (CTD). Após a fosforilação a enzima se liga mais firmemente com a fita de DNA.

Após a fortificação da ligação com o DNA alguns fatores gerais de transcrição se soltam e na RNA_pol associam-se novas proteínas, os fatores de alongamento que permite à enzima uma maior estabilidade para percorrer a fita de DNA dentro de uma bolha de transcrição.

Na medida em que a fita vai sendo transcrita e saindo da polimerase, vai acontecendo o processo de capeamento, que consiste na modificação da extremidade 5’ com o acréscimo de uma cap (revestimento) ou nucleotídeo de guanina modificado.

Com a transcrição avançando ocorre a associação de proteínas que realizarão o splincing.

Esse processo de splicing pode ser entendido como aquele onde ocorre em primários de RNA_m  que possui segmentos que não serão lidos, os íntrons,   que logo serão retirados, ficando apenas os éxons, que são os genes codificantes que farão parte das moléculas de RNA_m maduras e  logo serão ligados. Os íntrons são cortados pela regra GU – AG, ou seja, na ponta 5’ há geralmente GU e na ponta 3’ há comumente AG. Os nucleotídeos são reconhecido por cinco pequenas ribonucleoproteínas (U1,U2,U4,U5 e U6)  que juntas com mais 100 formam o spliceossomo que retira íntrons e une os éxons e é composto por _snRNA.

A retirada dos íntrons ocorre em etapas:

   1.    Ribonucleoproteínas U1 e U2 ligam-se ao sítio de corte em 5’ e ao ponto de ramificação interno A que e a adenina interna conservada.

    2.    O complexo U4-U5-U6 se junta ao spliceossomo.

   3.     Primeira reação de recomposição: uma ponta de íntron liga-se a adenina interna conservada.

   4.    Segunda reação de recomposição: outra ponta do íntron é cortada; os éxons juntam-se através de reações de transesterificação.

Após o splicing ocorre a poliadenização da extremidade 3’ pelo auxílio dos fatores de estimulação de clivagem(CsTF) e o fator de clivagem e poliadenização (CPSF) e a enzima poliA_polimerase­ adiciona de 150 a 200 nucleotídeos A(adenina) na extremidade 3’.

A transcrição termina com a chegada ao códon de parada. No fim da transcrição é gerado transcritos primários de RNA que passarão pelo processamento pós-transcricional, onde sofrerá modificações ainda dentro do núcleo pelas moléculas de _tRNA e _rRNA para enfim serem liberadas pelos complexos de poro, onde será levadas para o hialoplasma.

REFERÊNCIAS

GRIFFITHS, Antony J. F. et al. Introdução à genética. 9. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2009.